ਡੱਚ ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੇ ਇੱਕ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਟੈਸਟ ਵਿੱਚ CRISPR ਅਤੇ bioluminescence ਨੂੰ ਜੋੜਿਆਛੂਤ ਦੀਆਂ ਬਿਮਾਰੀਆਂ

ਨੀਦਰਲੈਂਡ ਦੇ ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਇੱਕ ਨਵਾਂ ਵਿਕਸਤ ਰਾਤ ਦਾ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਵਾਇਰਲ ਬਿਮਾਰੀਆਂ ਦੇ ਨਿਦਾਨ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਸਰਲ ਬਣਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਉਹਨਾਂ ਦਾ ਅਧਿਐਨ, ACS ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਬੁੱਧਵਾਰ ਨੂੰ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਹੋਇਆ, ਚਮਕਦਾਰ ਚਮਕਦਾਰ ਨੀਲੇ ਜਾਂ ਹਰੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਵਾਇਰਲ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਦਿੱਖ ਦਾ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ, ਇੱਕ-ਕਦਮ ਵਿਧੀ ਦਾ ਵਰਣਨ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਰੋਗਾਣੂਆਂ ਦੀ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਫਿੰਗਰਪ੍ਰਿੰਟਸ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾ ਕੇ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਲੀਨਿਕਲ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕਸ, ਬਾਇਓਮੈਡੀਕਲ ਖੋਜ, ਅਤੇ ਭੋਜਨ ਅਤੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਸੁਰੱਖਿਆ ਨਿਗਰਾਨੀ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮੁੱਖ ਰਣਨੀਤੀ ਹੈ।ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਰਿਐਕਸ਼ਨ (ਪੀਸੀਆਰ) ਟੈਸਟ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਉਹਨਾਂ ਲਈ ਵਧੀਆ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਜਾਂ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਕੁਝ ਸਿਹਤ ਸੰਭਾਲ ਸੈਟਿੰਗਾਂ ਜਾਂ ਸਰੋਤ-ਸੀਮਤ ਸੈਟਿੰਗਾਂ ਲਈ ਅਵਿਵਹਾਰਕ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ।
ਨੀਦਰਲੈਂਡਜ਼ ਦਾ ਇਹ ਸਮੂਹ ਇੱਕ ਤੇਜ਼, ਪੋਰਟੇਬਲ ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਵਿੱਚ ਆਸਾਨ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਵਿਧੀ ਵਿਕਸਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀਆਂ ਅਤੇ ਹਸਪਤਾਲਾਂ ਦੇ ਵਿਗਿਆਨੀਆਂ ਵਿਚਕਾਰ ਸਹਿਯੋਗ ਦਾ ਨਤੀਜਾ ਹੈ ਜੋ ਕਿ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸੈਟਿੰਗਾਂ ਵਿੱਚ ਲਾਗੂ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਉਹ ਫਾਇਰਫਲਾਈ ਫਲੈਸ਼ਾਂ, ਫਾਇਰਫਲਾਈ ਗਲੋਜ਼, ਅਤੇ ਜਲਜੀ ਫਾਈਟੋਪਲੈਂਕਟਨ ਦੇ ਛੋਟੇ ਤਾਰਿਆਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਸਨ, ਇਹ ਸਾਰੇ ਬਾਇਓਲੂਮਿਨਿਸੈਂਸ ਨਾਮਕ ਇੱਕ ਵਰਤਾਰੇ ਦੁਆਰਾ ਸੰਚਾਲਿਤ ਸਨ।ਇਹ ਗਲੋ-ਇਨ-ਦੀ-ਡਾਰਕ ਪ੍ਰਭਾਵ ਲੂਸੀਫੇਰੇਸ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਨ ਵਾਲੀ ਰਸਾਇਣਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਵਿਗਿਆਨੀਆਂ ਨੇ ਲੂਸੀਫੇਰੇਸ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਸੈਂਸਰਾਂ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤਾ ਜੋ ਕਿ ਜਦੋਂ ਉਹ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਲੱਭਦੇ ਹਨ ਤਾਂ ਨਿਰੀਖਣ ਦੀ ਸਹੂਲਤ ਲਈ ਰੌਸ਼ਨੀ ਛੱਡਦੇ ਹਨ।ਹਾਲਾਂਕਿ ਇਹ ਇਹਨਾਂ ਸੈਂਸਰਾਂ ਨੂੰ ਪੁਆਇੰਟ-ਆਫ-ਕੇਅਰ ਖੋਜ ਲਈ ਆਦਰਸ਼ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਉਹਨਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ ਕਲੀਨਿਕਲ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਟੈਸਟਾਂ ਲਈ ਲੋੜੀਂਦੀ ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦੀ ਘਾਟ ਹੈ।ਜਦੋਂ ਕਿ CRISPR ਜੀਨ ਸੰਪਾਦਨ ਵਿਧੀ ਇਹ ਸਮਰੱਥਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਇਸ ਨੂੰ ਕਮਜ਼ੋਰ ਸਿਗਨਲ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਕਦਮਾਂ ਅਤੇ ਵਾਧੂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਉਪਕਰਣਾਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਜੋ ਗੁੰਝਲਦਾਰ, ਰੌਲੇ-ਰੱਪੇ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੇ ਇੱਕ CRISPR-ਸਬੰਧਤ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਇੱਕ ਬਾਇਓਲੂਮਿਨਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਦੇ ਨਾਲ ਜੋੜਨ ਦਾ ਇੱਕ ਤਰੀਕਾ ਲੱਭਿਆ ਹੈ ਜੋ ਇੱਕ ਸਧਾਰਨ ਡਿਜੀਟਲ ਕੈਮਰੇ ਨਾਲ ਖੋਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਕਿ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਕਾਫ਼ੀ ਆਰਐਨਏ ਜਾਂ ਡੀਐਨਏ ਨਮੂਨਾ ਸੀ, ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੇ ਰੀਕੋਂਬਿਨੇਜ਼ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ (ਆਰਪੀਏ) ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ, ਇੱਕ ਸਧਾਰਨ ਤਕਨੀਕ ਜੋ ਲਗਭਗ 100 °F ਦੇ ਸਥਿਰ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਉਹਨਾਂ ਨੇ ਲੂਮਿਨਸੈਂਟ ਨਿਊਕਲੀਇਕ ਐਸਿਡ ਸੈਂਸਰ (LUNAS) ਨਾਮਕ ਇੱਕ ਨਵਾਂ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤਾ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਦੋ CRISPR/Cas9 ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਵਾਇਰਲ ਜੀਨੋਮ ਦੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸੰਮਿਲਿਤ ਹਿੱਸਿਆਂ ਲਈ ਖਾਸ ਹਨ, ਹਰ ਇੱਕ ਉੱਪਰ ਉਹਨਾਂ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਇੱਕ ਵਿਲੱਖਣ ਲੂਸੀਫੇਰੇਸ ਟੁਕੜੇ ਦੇ ਨਾਲ।
ਜਦੋਂ ਜਾਂਚਕਰਤਾ ਜਾਂਚ ਕਰ ਰਹੇ ਖਾਸ ਵਾਇਰਲ ਜੀਨੋਮ ਮੌਜੂਦ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਤਾਂ ਦੋ CRISPR/Cas9 ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕ੍ਰਮ ਨਾਲ ਜੁੜ ਜਾਂਦੇ ਹਨ;ਉਹ ਇੱਕ ਰਸਾਇਣਕ ਸਬਸਟਰੇਟ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਬਰਕਰਾਰ ਲੂਸੀਫੇਰੇਸ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਬਣਾਉਣ ਅਤੇ ਨੀਲੀ ਰੋਸ਼ਨੀ ਨੂੰ ਛੱਡਣ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦਿੰਦੇ ਹੋਏ ਨੇੜੇ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।.ਇਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਖਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਬਸਟਰੇਟ ਲਈ ਲੇਖਾ ਜੋਖਾ ਕਰਨ ਲਈ, ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੇ ਇੱਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜੋ ਹਰੀ ਰੋਸ਼ਨੀ ਨੂੰ ਛੱਡਦੀ ਹੈ।ਇੱਕ ਟਿਊਬ ਜੋ ਹਰੇ ਤੋਂ ਨੀਲੇ ਵਿੱਚ ਰੰਗ ਬਦਲਦੀ ਹੈ ਇੱਕ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜਾ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ।
ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੇ RPA-LUNAS ਅਸੈਸ ਵਿਕਸਿਤ ਕਰਕੇ ਆਪਣੇ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ, ਜੋ ਖੋਜ ਕਰਦਾ ਹੈSARS-CoV-2 RNAਬਿਨਾਂ ਥਕਾਵਟ ਵਾਲੇ ਆਰਐਨਏ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਦੇ, ਅਤੇ ਨੈਸੋਫੈਰਨਜੀਲ ਸਵੈਬ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ 'ਤੇ ਇਸਦੀ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ।COVID-19ਮਰੀਜ਼RPA-LUNAS ਨੇ 20 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ SARS-CoV-2 ਨੂੰ 200 ਕਾਪੀਆਂ/μL ਤੱਕ ਘੱਟ RNA ਵਾਇਰਲ ਲੋਡ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਸਫਲਤਾਪੂਰਵਕ ਖੋਜਿਆ।
ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਦਾ ਮੰਨਣਾ ਹੈ ਕਿ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਪਰਖ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਕਈ ਹੋਰ ਵਾਇਰਸਾਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।“ਆਰਪੀਏ-ਲੂਨਾਸ ਪੁਆਇੰਟ-ਆਫ-ਕੇਅਰ ਛੂਤ ਵਾਲੀ ਬਿਮਾਰੀ ਟੈਸਟਿੰਗ ਲਈ ਆਕਰਸ਼ਕ ਹੈ,” ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੇ ਲਿਖਿਆ।